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Diet Research Data (試験データ集):雄 C57BL/6Jマウスに対する High Fat Diet 32, Low Fat Diet および 他社高脂肪飼料給与の影響

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Diet Research Data (試験データ集):雄 C57BL/6Jマウスに対する High Fat Diet 32,  Low Fat Diet および 他社高脂肪飼料給与の影響

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Inquiry(お問い合わせ):

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1.目的


Low Fat Diet(LFD、10 kcal% fat、366kcal/100g)、High Fat Diet 32(HFD32、57 kcal% fat、508kcal/100g)と他社の肥満・糖尿病研究用の飼料(60 kcal% fat、520kcal/100g)について比較試験を行いました。

 

2.材料および方法


(1)試験の実施場所

日本配合飼料(株)(現フィード・ワン(株))中央研究所のマウス飼育室(コンベンショナル)にて実施しました。


(2)給与飼料

  • Low Fat Diet(以下 LFD):粗脂肪含量 4.0%、Fat kcal% 10.2%、可溶性無窒素物含量 64.3%、NFE kcal% 68.8%
  • High Fat Diet 32(以下 HFD32):粗脂肪含量 32.0%、Fat kcal% 56.7%、可溶性無窒素物含量 29.4%、NFE kcal% 23.2%
  • 他社飼料:粗脂肪含量 33.1%、Fat kcal% 58.1%、可溶性無窒素物含量 30.8%、NFE kcal% 24.2%


(3)動物

C57BL/6JJclマウスの雄を対象動物としました(1試験群あたり 10匹、合計 30匹)。


(4)飼育方法

  • 温度と湿度:温度= 21~ 25℃、湿度= 40~ 60%
  • 照明:12時間の明暗サイクル(点灯時間 9:00~ 21:00)
  • ケージ:滅菌木製チップを入れたポリカーボネート製ケージに 1匹ずつ入れて飼育
  • 飼料:自由摂取
  • 飲水:水道水を自由摂取


(5)試験方法

C57BL/6Jマウスを 4週齢で導入し、1週間の順化後(CE-2給与)、体重・血糖・5週齢の経口糖負荷試験の血糖値を指標に各群間に差が生じないように 3群に振り分けました。5週齢時から試験飼料の給与を開始し、20週齢まで給与しました。尚、有意差検定は Tukeyの方法で実施しました。


 

3.結果


以下に記載しております。

 

1.体重

体重変化

1週間毎に測定しました。図のポイントと縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は各週齢の試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。

 体重変化



2.摂餌量・飲水量

摂餌量の推移

摂餌量は、各週齢における 1日 1匹あたりの平均値を示しています。図のポイントと縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は各週齢の試験群間で実施し、図中の異符 号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。

摂餌量の推移

飲水量の推移

飲水量は、各週齢での 1日 1匹あたりの平均値を示しています。図のポイントと縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は各週齢の試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています ( p< 0.05)。

飲水量の推移

 

3.随時血糖値

随時血糖値の推移

採血は 3週間毎に尾静脈から採取し、採取時間は点灯 4時間後の午後 1時としました。全血を簡易血糖測定器(グルテスト PROR /(株)三和化学研究所)にて測定しました。 図の縦棒と縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は各週齢の試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。

随時血糖値の推移

 

4.空腹時血糖値

空腹時血糖値の推移

5, 15, 20週齢(試験飼料給与前、10週間、15週間)時に実施しました。一晩絶食(20時間)後、尾静脈より採血し、全血を簡易血糖測定器(グルテストPROR/(株)三和化学研究所)にて測定しました。図の縦棒と縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は各週齢の試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。

空腹時血糖値の推移

 

5.経口糖負荷試験

各週齢における経口糖負荷試験結果

5, 15, 20週齢(試験飼料給与前、10週間、15週間)時に実施しました。一晩絶食(20時間)後、グルコース溶液(2g/kg体重)を胃ゾンデで経口投与し、投与前(0分)、投与後 30、60、120分に尾静脈より採血し、全血を簡易血糖測定器(グルテストPROR/(株)三和化学研究所)にて測定しました。図のポイントと縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は各時間の試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。

各週齢における経口糖負荷試験結果-グラフ

各週齢における経口糖負荷試験結果-表

6.インスリン負荷試験

各週齢におけるインスリン負荷試験結果

10週齢および 20週齢時(試験飼料給与後、5週間および 15週間)に実施しました。インスリン溶液(0.5IU/kg体重)を腹腔内に投与し、投与前(0分)、投与後 20、40、60、80、120分に尾静脈より採血し、全血を用いて簡易血糖測定器(グルテストPROR/(株)三和化学研究所)で血糖値を測定しました。図のポイントと縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は各時間の試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。

各週齢におけるインスリン負荷試験結果

7.解剖時血液分析

血中脂質代謝関連物質分析結果

20週齢時に解剖を実施し、その際に血液を採取しました(各群 n数は10)。20時間絶食後セボフルラン麻酔下で開腹し、後大静脈から血液を採取し、血清に対して総コレステロール(T-Cho)・HDL-コレステロール(HDL-Cho)・トリグリセライド(TG)・遊離脂肪酸(NEFA)の分析を行った。図の縦棒と縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。


血中脂質代謝関連物質分析結果

空腹時インスリン

20週齢時に解剖を実施し、その際に血液を採取しました(各群 n数は10)。20時間絶食後セボフルラン麻酔下で開腹し、後大静脈から血液を採取し、血漿についてインスリン分析を実施しました。分析は、森永生科学研究所製のインスリン測定キット(マイクロプレートのEIAサンドイッチ法)を用いて測定しました。図の縦棒と縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。


空腹時インスリン

8.解剖時主要臓器重量

主要臓器重量

20週齢時に解剖を実施しました(各群 n数は 5)。20時間絶食後セボフルラン麻酔下で開腹し、各臓器を摘出し、重量を測定しました。図の縦棒と縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。


主要臓器重量

脂肪組織重量

20週齢時に解剖を実施しました(各群 n数は 5)。20時間絶食後セボフルラン麻酔下で開腹し、各臓器重量を測定しました。図の縦棒と縦線は平均値±標準誤差を表しています。 統計処理は試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p < 0.05)。


脂肪組織重量

主要臓器および脂肪組織重量

表の数値は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は試験群間で実施し、図中の異符号間に有意差があることを示しています( p< 0.05)。

主要臓器および脂肪組織重量

 

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