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Diet Research Data (試験データ集):雄F344ラットに対する異なる炭水化物/脂肪比を持つ飼料給与の影響

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Diet Research Data (試験データ集):雄F344ラットに対する異なる炭水化物/脂肪比を持つ飼料給与の影響

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1.目的


本研究では、異なる炭水化物/脂肪比を持つ飼料を給与した際の、ラットの肥満および耐糖能、肝臓中TG含量に及ぼす影響を検討することとしました。

 

2.材料および方法


(1)試験の実施場所

日本配合飼料(株(以下日配)中央研究所のラット飼育室(コンベンショナル)にて実施しました。


(2)給与飼料(特徴を表1~2に記載しました)

試験飼料の配合率および成分値は、表1および2の通りです。糖質は主に果糖、油脂源には主にサフラワー油を用い、炭水化物、粗脂肪含量の調整の為、コーンスターチ、ショ糖、精製粉末パーム油を使用しました。その他、各試験飼料配合率の特徴としては、下記の通りです。

  • 炭水化物(C):脂肪(F)のエネルギー比(kcal/energy)を調整し、C/Fが異なる4群(C/F=2.5、 1.3、0.6、0.3)になるように設計しました。
  • 糖については、果糖:ショ糖が1:3、脂肪についてはパーム油:サフラワー油が2:3になるよう調整しました。またC/F=2.5、1.3群については成型の為に、一部コーンスターチを炭水化物源として用いました。
  • タンパクカロリー比については、AIN-93Gレベル(20%付近)を維持しました。
  • その他原料については、カロリー比を考慮し調整しました。

(3)動物

5週齢の雄F344/Jclラットを用いました(n=10)。


(4)飼育方法

  • 温度と湿度:温度=21~25℃、湿度=40~60%
  • 照明:12時間の明暗サイクル(点灯時間 9:00~21:00)
  • ケージ:滅菌チップを入れたポリカーボネート製ケージに2匹ずつ入れて飼育しました。
  • 飼料:自由摂取としました。
  • 飲水:水道水を自由摂取としました。


(5)試験方法

4週齢のF344/Jclラットを導入し、1週間の馴致後、体重を指標に群間に差が生じないようにそれぞれ4群に振り分けました。また、ケージあたりの匹数は1としました。5週齢から13週齢まで試験飼料の給与を実施し、8週齢および12週齢で経口糖負荷試験を実施しました。また、9週齢で各群4匹、13週齢で各群6匹について、一晩絶食後(約15時間)解剖に供しました。この際、得られた血液サンプルは、血清中脂質代謝関連物質(総コレステロール、HDL-コレステロール、中性脂肪、遊離脂肪酸)の測定に供しました。さらに、解剖時に採取した肝臓は、中性脂肪含量の測定と共に、ヘマトキシリン&エオジン染色を行い、組織学的観察に供しました。尚、有意差検定はTurkey-Kramer法で実施しました。


 

3.結果


以下に記載しております。

 

1.飼料成分

表1 試験飼料配合率

 飼料成分配合率


表2 試験飼料一般成分分析値

 試験飼料一般成分分析値



2.摂餌量

摂餌量の推移

図1 摂餌量の推移

図のバーと縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は同一週齢の試験群間で実施し、図中の異符号間には有意差があることを示しています(p<0.05)。



表3 摂餌量の推移

摂餌量の推移

3.飲水量

飲水量の推移

図2 飲水量の推移

図のバーと縦線は平均値±標準誤差を表しています。統計処理は同一週齢の試験群間で実施し、図中の異符号間には有意差があることを示しています(p<0.05)。



表4 飲水量の推移

飲水量の推移

4.体重

体重

図3 体重

1週間毎に測定しました。図のバーと縦線は平均値±標準誤差を表しています。



表5 体重変化

体重変化

5.経口糖負荷試験結果

経口糖負荷試験結果

図4 経口糖負荷試験結果

8週齢と12週齢で実施しました。試験は、15時間絶食後、グルコースを経口投与(2g/kg体重)し、投与後30、60、120分後の血糖値を測定しました。統計処理は同一投与後時間の試験群間で実施し、図中の異符号間には有意差があることを示しています(p<0.05)。


表6 各週齢のF344ラットにおける経口糖負荷試験結果

各週齢のF344ラットにおける経口糖負荷試験結果


6.血中脂質代謝関連物質濃度

表7 血中脂質代謝関連物質濃度

血中脂質代謝関連物質濃度


7.相対臟器重量

表8 相対臓器重量

相対臓器重量


8.肝臓中中性脂肪含量と肝臓組織写真

解剖時肝臟中中性脂肪含量

図5 解剖時肝臟中中性脂肪含量

9週齢と13週齢の解剖時に採取した肝臓中の中性脂肪含量を測定しました。図のバーと縦線は平均値士標準誤差を表しています。図中の異符号間には有意差があることを示しています(p<0.05)。



表9 各系統のラットにおける肝臓中中性脂肪含量

各系統のラットにおける肝臓中中性脂肪含量


 

13週齡時肝臟組織写真(×200)

図6 13週齡時肝臟組織写真(×200)

A:CF2.5群、B:CF1.3群、C:F0.6群、D:CF0.3群


 



 

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